如何選擇符合實(shí)驗(yàn)要求的ELISA試劑盒?

　　標(biāo)簽：Elisa 本生試劑盒 標(biāo)準(zhǔn)品 抗體 封板膜 一次性吸頭 大鼠試劑盒

　　以下是天正信達(dá)選擇符合實(shí)驗(yàn)要求的ELISA試劑盒的系統(tǒng)性指南，涵蓋關(guān)鍵篩選維度和實(shí)操建議：

　　一、明確實(shí)驗(yàn)核心需求?

　　靶標(biāo)與物種匹配?

　　確認(rèn)目標(biāo)蛋白名稱(如IL-6、TNF-α)及物種(人/大鼠/小鼠等)，避免跨物種交叉反應(yīng)。

　　特殊樣本(如腦脊液、唾液)需選擇已驗(yàn)證兼容性的試劑盒。

　　樣本類型適配?

　　血清/血漿：選擇抗溶血、抗脂血干擾優(yōu)化的試劑盒。

　　細(xì)胞上清：注意培養(yǎng)基成分(如高濃度BSA)是否干擾檢測(cè)。

　　組織裂解液：需驗(yàn)證裂解緩沖液與試劑盒兼容性。

　　檢測(cè)類型選擇?

　　雙抗體夾心法?：適用于大分子蛋白(>10kDa)，靈敏度高。

　　競(jìng)爭(zhēng)法?：適合小分子(如激素、代謝物)檢測(cè)。

　　二、性能參數(shù)評(píng)估?

　　靈敏度與線性范圍?

　　低豐度蛋白(如pg/mL級(jí))需高靈敏度試劑盒。

　　確保樣本濃度落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，避免多次稀釋。

　　重復(fù)性與穩(wěn)定性?

　　批內(nèi)/批間變異系數(shù)(CV)應(yīng)<15%，優(yōu)選CV<10%的產(chǎn)品。

　　驗(yàn)證試劑盒開(kāi)瓶穩(wěn)定性(如4℃保存1周是否可用)。

　　抗體對(duì)驗(yàn)證?

　　優(yōu)先選擇雙單抗或經(jīng)Western Blot/質(zhì)譜驗(yàn)證的抗體。

　　交叉反應(yīng)率(CR)應(yīng)<10%，高特異性試劑盒CR可<1%。

　　四、避坑指南?

　　避免常見(jiàn)錯(cuò)誤?

　　不同批號(hào)試劑混用(洗滌液和終止液除外)。

　　未閱讀說(shuō)明書直接操作，忽略特殊樣本處理要求。

　　質(zhì)控紅線?

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線R2<0.99或陽(yáng)性對(duì)照OD值異常時(shí)需重做。

　　選擇時(shí)建議橫向?qū)Ρ?-5家品牌，結(jié)合文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)決策。

　　ELISA試劑盒在選購(gòu)時(shí)應(yīng)注意以下幾個(gè)方面：

　　1、明確研究種屬：一般來(lái)說(shuō)，廠家都會(huì)在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬。

　　2、明確樣本類型：不同廠家驗(yàn)證樣本類型不同，即使同一廠家不同試劑盒，其驗(yàn)證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本，因此購(gòu)買前需仔細(xì)核對(duì)。

　　3、會(huì)預(yù)測(cè)自己的目標(biāo)因子的濃度：一般來(lái)說(shuō)，待測(cè)因子可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或資料獲得參考的檢測(cè)范圍，且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。因而，必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測(cè)范圍的試劑盒極其重要。

　　4、檢查試劑盒進(jìn)行過(guò)哪些質(zhì)控：質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)在說(shuō)明書中即可找到，在購(gòu)買前檢查試劑盒是否進(jìn)行過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)控實(shí)驗(yàn)，包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗(yàn)、線性稀釋實(shí)驗(yàn)及交叉反應(yīng)測(cè)試等，每個(gè)數(shù)據(jù)最好都看一下，確保的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。

　　5、需檢測(cè)的因子數(shù)量：如果待測(cè)因子超過(guò) 5 個(gè)，且樣本量較小時(shí)，單因子 ELISA 檢測(cè)方法并不是好的選擇。建議考慮多因子檢測(cè)方法，可節(jié)約樣本及時(shí)間成本，也可保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。

　　注：以上資料僅供參考，不作為實(shí)際標(biāo)準(zhǔn)，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師。

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